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descriptioncours CHOLERA

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CHOLERA


CHOLERA Me1CHOLERA Chol02CHOLERA Col2






Ce genre bactérien se caractérise
bien sur le plan morphologique: bacilles à Gram-négatif incurvés et très
mobiles (colonies plates). Leurs caractères nutritifs leur permet de
supporter de fortes concentrations de sel et donc de survivre dans
divers environnements hydriques (eaux de mer, eaux saumätres). La
contamination est donc le plus souvent alimentaire ou hydrique. Diverses
espèces sont décrites chez l'homme dont V. cholerae.

D'autres espèces, halophiles (exigence d'ions Na+) sont
isolées chez l'animal, poissons ou crustacés par exemple, telles V. parahaemolyticus, responsabae de toxi-infections alimentaires comme au Japon. D'autres espèces telles V. alginolyticus ou encore V. vulnificus ont été observées dans des suppurations.



VIBRIO CHOLERAE







CHOLERA Chol01
Le choléra est une maladie diarrhéique très contagieuse, due à un bacille à Gram négatif, Vibrio cholerae.
Cette bactérie pathogène a un tropisme exclusivement digestif et vit à
l'état saprophyte dans l'eau des estuaires et parasite du zooplancton.
Les souches bactériennes responsables du choléra sont transmises par
voie orale à partir d’eau ou d’aliments contaminés et appartiennent aux
sérovars O1 et O139. Le traitement du choléra est basé sur la
réhydratation rapide des patients.
A - LE CHOLÉRA

Le choléra est une maladie strictement humaine entrainant une
diarrhée avec une déshydratation aiguë. Après une courte incubation
(quelques heures à 5 jours), la maladie débute par une diarrhée
fécaloïde, puis aqueuse sans fièvre, associée à des douleurs violentes
épigastriqures et abdominales et des vomissements en fusée.

La diarrhée devient incoercible, avec des grains riziforme,
déshydratation aiguë et hypothermie et collapsus cardio-vasculaire.





CHOLERA CholeraCHOLERA Vibrion



Cependant, l’infection par V. cholerae
est souvent asymptomatique (90% des cas), avec élimination des
bactéries dans les selles pendant plusieurs jours. Le spectre de la
maladie va de la diarrhée banale (10% des sujets infectés) et au choléra
sévère (1% des infectés).


B - ÉPIDÉMIOLOGIE DU CHOLÉRA

Les sept pandémies de choléra

Depuis le début du XIXème siècle, sept pandémies se sont
succédées jusqu'à nos jours. A partir de 1817, les six premières
pandémies parties du delta du Gange et du Bangladesh, sont dues à des
souches de V. cholerae O1 biovar Cholerae (dit classique). En
1961, une souche O1 d’un nouveau biovar Eltor, provenant des îles
Célèbes, a émergé et provoqué la 7ème pandémie, qui atteignit en 1961
l'Afrique et l'Amérique latine en 1991. Le choléra s'est installé à
l'état endémique en Afrique, Asie et Amérique latine.




CHOLERA Pandemie1

CHOLERA Pandemie2



En 1992 , une nouvelle souche
épidémique inconnue jusque-là fut responsable d’une grave épidémie de
choléra en Inde et au Bangladesh. Cette souche était apparentée au
biovar Eltor et présentait un nouveau sérovar dit O139. On peut redouter
que cette nouvelle souche, implantée à l'état endémique en Inde et au
Bangladesh soit à l'origine d'une 8ème pandémie.





CHOLERA Pandemie5 CHOLERA Pandemie6









C - HABITAT ET TRANSMISSION DU CHOLÉRA


V. cholerae est une bactérie
saprophyte retrouvée dans l’environnement , particulièrement dans les
eaux saumâtres des estuaires, les lits des fleuves et au contact du
zooplancton (copépodes), des algues marines et des plantes aquatiques
dans la plupart des zones côtières des régions tempérées ou tropicales
du monde.. La bactérie peut contaminer les fruits de mer et l’ intestin
des poissons. Elle survit pendant 50 jours dans l'eau de mer à 5-10°C,
10-12 jours à 30-32°C, expliquant son existence saprophytique et sa
persistence limitée aux zones intertropicales. Les souches de sérovar O1
(LPS) semble particulièrement adapté à l’intestin humain. La virulence
et le caractère épidémique des souches pathogènes proviendraient de
l'acquisition séquentielle par une souche O1 de gènes de virulence
portés par des phages, des transposons ou des plasmides, et codant des
toxines et des pili. L'histoire du choléra illustre la dynamique
d'adaptation d'un agent pathogène à son hôte en fonction de
l'environnement, de la résistance naturelle et du comportement des
populations qu'il infecte.

V. cholerae est transmis par voie orale par les aliments et l'eau de boisson contaminés. Au cours du choléra, V. cholerae est éliminé pendant 5-10 jours en très fortes quantités (109
bactéries / ml) dans les selles aqueuses des patients (parfois 10-20 l/
jour). Les porteurs sains très nombreux au cours des épidémies sont un
important vecteur de propagation du choléra. La dose infectante est
élevée chez les personnes sans facteur de risque, notamment à cause de
l’acidité gastrique (>108 bactéries). En présence de bicarbonate de soude ou absorbées avec des aliments, des doses de 103-104 suffisent à déclencher la diarrhée.


Le risque de contamination en zone d’endémie vient de l’eau
stagnante massivement polluée (égouts, fèces) et de la contamination des
mains qui contribuent à la contamination de la nourriture. Le choléra
est une maladie des mains sales. La cuisson de l’eau et des aliments est
une protection simple et efficace de la propagation de la maladie.


D - PHYSIOPATHOLOGIE DU CHOLÉRA

La diarrhée du choléra

Les vibrions sont absorbés par voie
orale avec l’eau de boisson ou les aliments après contact direct avec
des patients ou des porteurs sains. L’acidité gastrique protège
partiellement de la contamination. Les bactéries se multiplient alors
dans la lumière de l'intestin grêle et traversent la couche de mucus
tapissant la muqueuse intestinale.





CHOLERA Adher1 CHOLERA Adher2



Les bactéries adhèrent intimement à
la bordure en brosse des entérocytes par des pili de type IV constitués
de la protéine TCP(gène tcpA) qui interagissent à des récepteurs
inconnus. Les pili sont codés par une quinzaine de gènes formant un îlot
de pathogénicité porté par le phage VPIØ.

Le syndrome diarrhéique est dû à la sécrétion in situ
d'une exotoxine protéique qui entraîne une fuite d'eau et
d'électrolytes. Cette toxine est une protéine thermolabile composée d’
une sous-unité H (ou A) de 28 kDa et de 5 sous-unités L (ou B) de 8 kDa.
L'exotoxine se fixe par ses sous-unités L au ganglioside GM1, récepteur
glycolipidique de la membrane des entérocytes. La sous-unité H est une
pro-enzyme avec activité ADP-ribosylase révélée par protéolyse. Cette
ADP-ribosylase libérée dans le cytoplasme active l'adénylcyclase des
entérocytes en bloquant la sous-unité a de la protéine Gs qui
normalement inhibe cette enzyme. Ceci induit une augmentation de l'AMPc
intracellulaire, et provoque l'excrétion anormale d'ions sodium et la
fuite hydrique.





CHOLERA Tox1 CHOLERA Adenyl



Les gènes ctxA et ctxB
de la toxine cholérique sont localisés le phage filamenteux CTXØ
formant un îlot de pathogénicité de 4,5 kb. Fait intéressant, les pili
eux-mêmes sont les récepteurs du phage CTX Ø, suggèrant que les souches
virulentes piliées et toxinogènes proviennent de l’acquisition
successive du phage codant pour les pili, puis de celui codant pour la
toxine cholérique.


CHOLERA Ilot
Le LPS jouerait aussi un rôle dans
la colonisation de l'épithélium intestinal et dans la pathogénie de la
maladie, peut-être par production de cytokines par l'épithélium. Les
gènes codant pour le LPS forment un autre îlot de pathogénicité (22 kb
pour le LPS O1, et 37 kb pour le LPS O139). Le LPS est un antigène
protecteur majeur induisant l'apparition d'anticorps vibriocides
protecteurs.

Les gènes de virulence de V. cholerae (plus de 17 gènes,
dont ctxA et ctxB et ceux des pili) sont contrôlés par le gène toxR
codant pour un activateur transcriptionnel. ToxR est induit par des
stimuli environnementaux (température, pH, osmolarité).

Immunité

L’immunité contre V. cholerae
est essentiellement humorale et de courte durée (2 à 3 ans). En zone
d'endémie, les enfants paient un lourd tribu à la maladie, alors que les
adultes sont relativement épargnés du fait de contaminations itératives
qui leur confèrent une immunité parfois abrogée par la malnutrition.
L’immunité contre V. cholerae est liée à la capacité de coloniser les
plaques de Peyer de la muqueuse intestinale. Les bactéries ingérées par
les cellules M des plaques de Peyer sont transportées aux macrophages
qui les détruisent et les présentent aux lymphocytes T et B. La toxine
fixée est aussi transférée par transcytose aux lymphocytes de la lamina
propria. Les lymphocytes B des plaques de Peyer et de la lamina propria
sécrètent dans la lumière intestinale des immunoglobulines, notamment de
type IgA et IgG, qui sont des anticorps opsonisants et vibriocides
anti-pili et anti-LPS et des anticorps neutralisant la toxine
cholérique. On peut détecter chez les sujets exposés à V. cholerae
la présence d’anticorps sériques agglutinants et bactéricides, avec un
pic à la 2ème semaine, qui vont ensuite disparaître en 4 semaines.














E - DIAGNOSTIC DU CHOLÉRA

Examen microscopique des selles

Chez les patients cholériques, on le
met en mise exclusivement dans les selles et parfois sur la peau. Au
cours du choléra dans les formes sévères, les vibrions sont visibles en
très grande abondance et très mobiles à l’état frais dans les selles
aqueuses. V. cholerae est un un bacille à Gram négatif en virgule (comma), très mobile avec un cil polaire (monotriche).





CHOLERA Gram CHOLERA Cil



Isolement et identification en culture


Chez les patients cholériques, V. cholerae
est facilement isolé en culture presque pure sur géloses ordinaires ou
alcalines (pH 9,6) ou sur certains milieux type TCBS (thiosulfate,
citrate, sels biliaires, saccharose), incubés à 37°C. Les colonies
apparaissent en 8h à 10h, de 2-3 mm, transparentes (‘’comme du verre’’).
Chez les sujets porteurs sains ou avec simple diarrhée, il convient
d’utiliser des milieux d’enrichissement type bouillon alcaline
hypersalée ou eau peptonée pour isoler les germes souvent en faibles
quantités


CHOLERA Vibrio



CHOLERA SaccCHOLERA ColbCHOLERA Col



V. cholerae est une bactérie
oxydase+, aéro-anaérobie, capable de respirer et de fermenter les
sucres. Le diagnostic est d'abord biochimique. Les bactéries fermentent
plusieurs sucres sans production de gaz : incluant le glucose et le
D-saccharose. En eau peptonée, on peut réaliser la réaction dite du
choléra-roth, mettant en évidence la production d’ indole-nitrite avec
l’acide sulfurique. Les conditions de croissance de V. cholerae
sont: (1) une température optimale entre 30-37°C; (2) une tolérance au
NaCl (halotolérance: 1-3%) , inhibition à 7% de NaCl; (3) un pH de
croissance de 7 à 10, la multiplication étant inhibée à pH acide (pH
< 6 ). V. cholerae sécrète de nombreuses enzymes (lécithinase,
lipase, amylase) et produit certains enzymes métaboliques (ornithine
décarboxylase ODC+).





CHOLERA Apiea
CHOLERA Apieb



Les biovars: On distingue 2 biovars principaux : le biovar Cholerae (ou classique) correspondant aux souches de la 6ème pandémie et le biovar Eltor retrouvé chez les souches de la 7ème pandémie.

Les sérovars: V. cholerae
présente une grande diversité clonale (>73 électrotypes) et des
sérovars définis par la structure antigènique du lipopolysaccharide
(LPS) (>170 sérovars). Seuls, un très petit nombre de sérovars sont
retrouvés dans les souches à potentiel épidémique : les souches
épidémiques appartiennent uniquement aux sérovars O1 et O139. Les
souches dites non-O1-non-O139 proviennent de l’environnement et sont
rarement à l’origine de cas sporadiques de diarrhée banale sans
potentiel épidémique dans le monde entier. A part, des souches dites O1
endémiques, responsables de diarrhées sans gravité aux USA et en
Australie, dues à des contaminations de fruits de mer.





Sérovars et biovars de V. cholerae en fonction de leur potentiel épidémique.

Recherche par agglutination rapide sur lame

CHOLERA Agg



F - TRAITEMENT DU CHOLÉRA

Le traitement du choléra est basé sur
la réhydratation d'urgence, par voie veineuse, pour compenser les pertes
hydro-électrolytiques massives observées chez certains patients. Des
solutés hydro-électrolytiques standardisés ont été proposés par l'OMS,
par exemple la solution contenant : Na+ 135 mEq/L, K+ 15 mEq/L, HCO3- 40 mEq/L, Cl-
100 mEq/L (osmolarité totale 290 mEq/l). Cette réhydratation d'urgence
entraîne une amélioration clinique rapide. Ce traitement seul suffit à
guérir du choléra car les défenses immunitaires sont capables d'éliminer
complètement le germe en quelques jours. Cependant, il est évident que
la destruction des vibrions dans l'intestin hâtera la guérison, le
traitement d'appoint est basé sur l'administration pendant 4 jours,
d'une dose de tétracycline de 2 g chez l'adulte et 25-50 mg/kg/j chez
l'enfant, ou de triméthoprime-sulfaméthoxazole (480 mg, 2 400 mg/j chez
l’adulte; 6 mg/30 mg/kg/j chez l'enfant) en 4 prises orales. Ce
traitement réduit le risque de dissémination du germe qui disparaît des
selles en quelques heures. Cependant, il existe des souches de V. cholerae résistantes à la tétracycline, et parfois poly-résistantes à divers antibiotiques par acquisition de plasmides.


E- PROPHYLAXIE DU CHOLÉRA

La prophylaxie du choléra est
basée sur le contrôle de la dissémination du germe et sur la diminution
de l'état de réceptivité des sujets sains par la vaccination. Le
contrôle de la dissémination se fait par des mesures d'hygiène simple:
désinfection des mains du personnel soignant, désinfection par des
antiseptiques des selles, des vomissements et des objets contaminés. Des
mesures collectives sont aussi indispensables et efficaces:
amélioration des conditions sanitaires, de la qualité des eaux de
boisson et des installations sanitaires, des habitudes d'hygiène
individuelles. Les différents vaccins testés sont administrés par
sous-cutanée, intradermique ou buccale. Longtemps, le seul vaccin
disponible était constitué de bactéries entières (V cholerae O1)
tués par le phénol et injecté par voie parentérale (2 doses à 15 jours
d’intervalle). Ce vaccin ne confère qu’une protection contre le choléra
de 50% pendant seulement 6 mois. Deux vaccins oraux ont été proposés. Le
vaccin tué WC/rBS constitué de V cholerae O1 tués avec sous-unité B
recombinante de la toxine cholerique (WC/rBS) conférant une protection
de 85-90% pendant 6 mois et une protection de 50-60% pendant au moins 3
ans. Le vaccin vivant atténué CVD 103-HgR est constitué d’une souche
vivante atténuée de V cholerae O1 génétiquement manipulée qui donnerait
un taux de protection de >80% durant au moins 6 mois contre V cholerae O1.
Ce vaccin est bien toléré, même chez l’immunodéprimé et les femmes
enceintes Cependant, il faut savoir que les vaccins disponibles ne
protègent pas contre V cholerae O139 et n'empêchent pas le
portage des bactéries, et donc la dissémination de la maladie sujets
réceptifs. Les campagnes de vaccination permettent néanmoins d'améliorer
l'état sanitaire de la population et de contrôler la propagation de la
maladie.


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merciii





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